近期，来自中国药科大学、中国医学科学院/北京协和医学院、中国科学院微生物研究所、清华大学等多家科研机构的研究团队在Nature旗下多学科顶刊《Nature Communications》发表了文章《Split intron-exon system for circular RNA synthesis》。文中开发了一种用于circRNA合成的分体式内含子-外显子（SIE）系统，通过将核酶与其底物在物理上分离，突破“一酶一产物”的固有局限，确保高效的circRNA合成，推动了circRNA疗法的多样化和规模化的发展。然而，合成只是第一步，真正的考验在于下游纯化---如何从复杂的反应体系中获得高纯度的circRNA。研究团队给出的答案是：依利特EClassical 3200系列高效液相色谱系统。在circRNA纯化与表征环节，采用该系统，基于体积排阻分离机理对RNA进行分析与收集，成功实现了环状产物与杂质的分离。值得一提的是，EClassical 3200的P3200高压恒流泵采用专利设计的脉动阻尼器配合梯度混合器，极大降低了输液脉动并提升混合效果；D3210紫外-可见检测器采用专利设计的光路结构以及分光系统，兼顾高灵敏度与宽线性范围。两者协同，能够满足circRNA纯化对分离度的要求。

色谱条件

色谱柱：SEC（5 μm，1000 Å，4.6×300 mm）

流动相：无RNase磷酸盐缓冲液（150 mM磷酸钠，pH 7.0）

流速：0.6 mL/min

检测波长：UV 260 nm

图1.通过SIE系统合成的circRNA的纯化与表征

(a：RNase R消化实验用于区分通过SIE系统合成的circRNA。图中标注了核酶/AnaR、底物/SEGFP和circRNA

的对应条带。b：HPLC纯化图谱)

基于依利特EClassical 3200系统进行HPLC纯化，根据保留时间（虚线所示）精准收集circRNA目标峰。结果显示，circRNA与线性杂质实现了高效分离，验证了该系统在复杂RNA样品纯化中的稳定分离性能与灵敏检测能力，为后续RT-PCR、测序验证、细胞转染及体内实验提供了高纯度样品保障。

结语

从SIE系统的高效合成，到依利特EClassical 3200的精准纯化，该研究为circRNA的规模化制备提供了可借鉴的技术路径。国产仪器登上Nature子刊，不仅是一次产品性能的验证，更是国产色谱技术在前沿生物医药领域的一次实力亮相。未来，依利特科技将持续为生物医药等领域提供高质量的色谱分离解决方案。